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酶和代谢物分析技术
1.酶反应动力学定量时的观察对象是
A、总单位时间内酶的减少或增加的量
B、单位时间内酶的减少或增加的量
C、总反应时间内酶的减少或增加的量
D、总反应时间内底物减少或产物增加的量
E、总单位时间内底物减少或产物增加的量
参考答案: E
题目解析:酶反应动力学主要研究酶催化反应的过程与速率,以及各种影响酶催化速率的因素,定量时的观察对象是总单位时间内底物的减少或产物增加的量。
2.在酶活性测定的试剂中,哪一种试剂最重要( )。
A、活化剂种类和浓度
B、复构剂种类和浓度
C、抑制剂种类和浓度
D、辅因子的浓度
E、底物的种类和浓度
参考答案: E
3.温度对酶促反应的影响是
A、每增加10℃,酶促反应速度增加1~2倍
B、能降低酶促反应的活化能
C、超过37℃后,温度升高时,酶促反应变慢
D、一般地说,在25~35℃之间,温度每增加10℃,酶促反应速度增加1~2倍
E、温度可影响酶促反应的平衡点
参考答案: D
题目解析:化学速度随温度升高而加快,酶反应也不例外。Q10值即温度增加10℃,化学速度的变化率。酶的Q10值在1.5~2.5。其温度影响很大,不同的温度酶反应的速率不同,将直接影响测定结果。常规工作实验室越来越多的使用37℃。因为温度升高,反应速度快,灵敏度高。同时延滞时间和测定时间都可能缩短,从而有利于提高工作率。在37℃时,不可避免地一些酶可能失活
4.下列说法错误的是
A、以脱氢酶为指示酶的系统测定的是辅酶Ⅰ(NAD+)或辅酶(NADP+)在540nm处的吸光度增高来计算出被测物的浓度
B、最常用的耦联指示系统有两个:一个是脱氢酶系统,另一个为氧化酶系统。
C、可利用脱氢酶的逆反应,将NAD(P)H变为NAD(P),测定340nm处吸光度的下降来计算被测物的浓度
D、终点法受到乳糜、黄疸和溶血的影响,测定时需设定样品空白
E、为了消除内源性脱氢酶的干扰,在反应时一般加入乳酸脱氢酶的抑制剂
参考答案: A
题目解析:以脱氢酶为指示酶的系统测定的是辅酶Ⅰ(NAD+)或辅酶(NADP+)在340nm处的吸光度增高来计算出被测物的浓度,也可利用脱氢酶的逆反应,将NAD(P)H变为NAD(P),测定340nm处吸光度的下降来计算被测物的浓度。
5.SI制的酶单位Katal的含义( )。
A、每秒钟能催化1μmol底物的酶量为1Katal
B、每分钟能催化1μmol底物的酶量为1Katal
C、每秒钟能催化1个单位的底物的酶量为1Katal
D、每秒钟能催化1mol的底物的酶量为1Katal
E、每分钟能催化1个单位的底物的酶量为1Katal
参考答案: D
题目解析:近年来国际上大力推广SI制,我国已明确SI制为法定计量单位制,此时酶活性单位为Katal,即1秒中转化1个摩尔底物的酶量,常用单位为μKatal或nKatal。
6.在何种情况下反应速度可达最大反应速度
A、产物浓度足够大
B、底物浓度足够大
C、底物浓度足够小
D、产物浓度足够小
E、酶浓度足够小
参考答案: B
题目解析:在检测试剂中底物浓度、辅因子、活化剂、复构剂的种类和浓度均对酶的测定至关重要。其中以底物的种类和浓度最为重要。一般而言,在多种底物中,Km最小的底物往往是此酶的生理底物。选择Km小的底物测定酶还有一个优点,就是在最大反应速度V的底物浓度也将最低。在实际工作中可能意味着试剂成本可能较低,不易出现底物难溶解的困难。
7.关于酶活性国际单位下列说法正确的是
A、1s能转化1微摩尔底物(μmol)的酶量为一个国际单位(μmol/min)
B、1min能转化1微摩尔底物(μmol)的酶量为一个国际单位(μmol/min)
C、1h能转化1微摩尔底物(μmol)的酶量为一个国际单位(μmol/min)
D、1min能转化1微摩尔底物(mmol)的酶量为一个国际单位(mmol/min)
E、1h能转化1微摩尔底物(mmol)的酶量为一个国际单位(μ=mmol/min)
参考答案: B
题目解析:酶活性国际单位是1min能转化1微摩尔底物(μmol)的酶量为一个国际单位(μmol/min)。
8.下列说法错误的是
A、在检测试剂中底物浓度、辅因子、活化剂、复构剂的种类和浓度均对酶的测定至关重要
B、以底物的种类和浓度最为重要
C、米氏方程在选择酶测定底物浓度有着重要的指导作用
D、在多种底物中,Km最大的底物往往是此酶的生理底物
E、pH影响酶的稳定
参考答案: D
题目解析:一般而言,在多种底物中,Km最小的底物往往是此酶的生理底物。选择Km小的底物测定酶还有一个优点,就是在最大反应速度V的底物浓度也将最低。在实际工作中可能意味着试剂成本可能较低,不易出现底物难溶解的困难。
9.影响酶活性测定的因素下列选项最合适的是
A、试剂中表面活性剂的作用
B、酶反应的最适pH
C、最适温度
D、底物浓度
E、以上都是
参考答案: E
题目解析:影响酶活性的因素包括底物的浓度、酶反应的最适pH、最适温度、酶的抑制作用,另外还包括试剂中表面活性剂的作用等因素。
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